早期进展性脑梗死患者血清HINGBI、TNF—α水平动态变化及意义

【摘要】 目的：本研究旨在观察早期进展性脑梗死（early progressive cerebral infarction，EPCI）患者的临床危险因素，探讨HMGB1、TNF-α两种免疫炎症因子在EPCI患者血清中表达水平的动态变化及临床意义。方法：选取脑梗死急性期患者75例，其中30例为EPCI组，45例为非进展性卒中（non-progressive cerebral infarction，NPCI）组，并收集同时期于门就诊的患有脑动脉硬化基础疾病者50例为对照组。入院患者分别于住院后1、3、7 d进行NIHSS评分，空腹抽取血清检测HMGB1和TNF-α浓度。对照组抽取一次清晨空腹血清检测HMGB1、TNF-α的浓度。结果：（1）EPCI组与NPCI组血清中HMGB1、TNF-α浓度3次测定值均显著超过门诊对照组（P<0.01），且有逐渐上升趋势（P<0.05），其中NPCI组HMGB1第3天与第7天对比上升差异无统计学意义（P>0.05），血清TNF-α浓度第3天达峰值（P<0.05），第7天时下降幅度较大。（2）EPCI组患者第1、3、7天空腹血清HMGB1浓度均明显高于NPCI组，差异有统计学意义（P<0.05）；其第3天和第7天空腹血清TNF-α浓度均高于NPCI组（P<0.05），而两组间第1天空腹血清TNF-α浓度对比差异无统计学意义（P>0.05）。（3）Person关联性分析显示，第1、3、7天两组患者整体空腹血清HMGB1浓度与NHISS成正相关（r=0.6、0.5、0.5，P<0.001）；第1、3天两组患者整体空腹血清TNF-α浓度与NHISS成正相关（r=0.3、0.4，P<0.01），第7天两组患者整体空腹血清TNF-α浓度和NHISS间无相关性（r=0.1，P=0.25）。结论：血清HMGB1与TNF-α的动态变化参与ACI的动态病理生理进程。动态观察态HMGB1血清浓度在预测卒中进展中比TNF-α更有意义。

【关键词】 进展性脑梗死； 免疫炎症反应； 高迁移率族蛋白盒1； 肿瘤坏死因子α

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2018.24.026 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2018）24-0053-03

脑卒中是世界上仅次于缺血性心脏病的第二大常见的死亡原因，约占全世界死亡人口的9%。在发达国家即使有更多更优质的医疗资源，仍然有占10%～12%的死亡人口是由于脑卒中及脑卒中后遗症所引起。据估计，每年有500万人的死亡与脑卒中相关，大部分发生在不发达国家，约占2/3，各种类型脑梗死在所有脑卒中患者中占比60%～70%，入院后的死亡率估计达11%～15%，其高发病率、高致死率及高致残率已经成为严重危害公众健康的疾病之一[1]。其中EPCI占所有缺血性脑卒中病例的20%～40%，一直是临床上常见的、备受关注的问题之一。

目前早期进展性脑梗死（early progressive cerebral infarction，EPCI）的病因尚不明确，影响因素众多，相关文献报道，高血压病病史糖尿病病史、卒中病史、冠心病病史、颈动脉狭窄、喝酒抽烟史等都可能是造成EPCI的危险因素[2]。目前国内外的报道认为血清及脑中氧化应激及免疫炎症机制的动态改变与脑卒中患者病情严重程度及是否发生病情恐化息息相关[3-4]。

高迁移率族蛋白盒1（High-mobility group protein box-1， HMGB1）为高迁移率族蛋白家族成員之一，是一种能促发炎症反应的核蛋白[5]。肿瘤坏死因子超家族（tumor necrosis factor，TNF）是一大类在体内由多种免疫细胞直接分泌的，有着复杂生物学作用的免疫炎症因子，目前已知的主要包括参与机体抵抗肿瘤细胞生长，还可以调节机体免疫防御功能、介导炎性反应。最近有文献报道指出其多个成员与ACI的缺血再灌注损伤紧密相关，其中TNF-α最具有代表性[6]。本研究旨在观察探讨HMGB1、TNF-α两种免疫炎症因子在EPCI血清中表达水平的动态变化与脑梗死早期进展是否相关。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年6月1日-2016年12月30日于厦门大学附属第一医院院神经内科入院治的ACI患者75例，其中男40例，女35例。同时收集同时期于诊就诊的患有高血压病、糖尿病、冠心病、高脂血症等基础疾病者50例设为具有脑梗死危险因素的匹配对照组。ACI患者纳入标准：（1）发病24 h内入院；（2）符合文献[7]中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010的诊断标准；（3）前循环供血区的梗死；（4）入院时不伴有意识障碍。排除标准：（1）短暂性脑缺血发作、症状波动性脑梗死；（2）脑出血；（3）既往有肿瘤、血液系统或免疫系统疾病，发病前后有严重感染；（4）发病前后使用激素、免疫抑制剂或溶栓药物；（5）合并其他脏器严重疾病（心、肝、肾功能不全等）。每位入选ACI患者分别于入院后1、3、7 d进行NIHSS评分，3 d与1 d相比较，NIHSS评分>2分的患者纳入EPCI组，≤2分的患者纳入NPCI组。记录所有一般项目及辅助检查资料。

1.2 方法

（1）血清HMGB1、TNF-α浓度的检测：采集所有入选患者入院1、3、7 d 3次及门诊危险因素匹配者1次空腹静脉血4 ml，所有标本室温下放置大于1 h。（2）使用高速离心机以3 500 r/min的速度离心标本10 min。（3）离心后用移液器取上层血清。（4）按顺序分装于2个0.5 ml的EP管中，标明编号。（5）储存于-80度冰箱中集中监测。测定采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测EPCI组、NPCI组及门诊危险因素匹配组血清样本中HMGB1、TNF-α的浓度。人HMGB1酶联免疫吸附测定试剂盒由江莱生物科技公司提供，人TNF-α酶联免疫吸附试剂盒由武汉博得生物科技公司提供，检测方法严格按照购买试剂盒的检测说明要求。

1.3 统计学处理

采用SPSS进行数据分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，相关性使用Person相关性分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者基本情况比较

所有入选病例组患者年龄、性别、高血压病史、糖尿病病史、冠心病病史、抽烟及饮酒史与门诊危险因素匹配组比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。同时，EPCI和NPCI两组患者基本特征的比较中，年龄、性别、高血压病史、冠心病病史、家族中风史、血清HDL-C、抽烟喝酒史差异无统计学意义（P>0.05），EPCI组中颈动脉狭窄发生率、血清TC、TG、LDL-C均明显高于NPCI组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。EPCI组中患者NIHSS评分从第1天至第7天逐渐升高，NPCI组中患者NIHSS评分趋于平稳并有下降趋势。两组患者第1天NIHSS评分差异无统计学意义（P>0.05），第3天及第7天差异有统计学意义（P<0.001），见图1。

2.2 不同发病时间各组血清HMGB1、TNF-α浓度比较

EPCI、NPCI两组整体情况：EPCI组患者空腹血清中HMGB1、TNF-α浓度从第1天至第7天均显著超过门诊危险因素匹配对照组（P<0.01），且有逐渐上升趋势（组内与前一时间段对比，P<0.05），NPCI组患者空腹血清中HMGB1、TNF-α浓度从第1天至第7天均显著超过门诊危险因素匹配对照组（P<0.01），其中血清HMGB1浓度有逐渐增高趋势，但第3天与第7天对比上升差异无统计学意义（P>0.05），血清TNF-α浓度第3天达峰值（组内与前一时间段对比，P<0.05），第7天时出现明显下降，见图2和图3。两组间比较：EPCI组患者第1、3、7天空腹血清HMGB1浓度均明显高于NPCI组（P<0.05），EPCT组患者第3天和第7天空腹血清TNF-α浓度均高于NPCI组（P<0.05），而两组间患者第1天的空腹血清TNF-α浓度对比差异无统计学意义（P>0.05）。Person关联性分析，1、3、7天两组患者整体空腹血清HMGB1浓度与NHISS成正相关（r=0.6、0.5、0.5，P<0.001）；第1、3天两组患者整体空腹血清TNF-α的浓度与NHISS之间成正相关（r=0.3、0.4，P<0.01），第7天两组患者整体空腹血清TNF-α浓度和NHISS间无相关性（r=0.1，P=0.25）。

3 讨论

EPCI是一类临床上症状迅速进展的脑梗死，它使得50%～70%的存活患者长期遗留有偏瘫、语言障碍或痴呆等极其影响生活质量的症状。造成这种不良后果的主要原因很多，如果能早期识别出这类患者，仍有许多减慢病情进展及改善预后的空间。寻找早期预测和识别EPCI的方法，在ACI的治疗中有很大的临床意义。

3.1 EPCI的临床危险因素

ACI的发病是由多种临床危险因素一起共同作用的结局。本研究结果中，年龄、性别、高血压病病史、冠心病病史、抽烟史、饮酒史在EPCT与NPCI中差异无明显不同（P=0.05），糖尿病病史、颈动脉狭窄率、高脂血症、高纤维蛋白原在EPCT组中明显高于NPCI组（P<0.05）。这与既往报道的结果类似。

3.2 HMGB1与TNF-α参与EPCI的病理生理过程

脑缺血后的炎症反应是免疫系统对组织内环境破坏的反应。血管闭塞时炎症级联反应立即被激活。细胞因子在缺血性卒中中的作用已引起众多学者的关注。因此我们认为EPCI患者与NPCI患者相比较，临床损伤加重的病理生理很可能与这一免疫激活事件有关。

3.3 1 HMGB1与EPCI的关系

HMGB1菌性炎症中的作用已经被大家所熟知，最初被认为是一种广泛存在、大量表达的非组蛋白脱氧核糖核酸结合蛋白，它在维持核内环境稳态方面发挥重要作用。HMGB1的增多可引起梗死后的二次损伤导致神经功能缺损症状的恶化，也参与调节试验性大鼠脑缺血后的炎症级联反应[8-9]。我们认为它可能预测EPCI有用的预后生物学标记物。

本次研究中发，EPCI组及NPCI组患者血清HMGB1浓度均显著超过门诊危险因素匹配组，且和神经功能的缺损程度NIHSS成正相关，这与之前国外的文献报道类似[10]。本研究进一步发现EPCI组与NPCI组间血清HMGB1浓度的动态变化有所不同，EPCT组患者血清HMGB1浓度从第1天至第7天逐渐升高，且均显著超过NPCI组，而NPCI组患者血清HMGB1浓度第7天与第3天相比无明显差异。除此之外，一周之内患者整体空腹血清HMGB1浓度变化与NHISS成正相关。综上结果可认为血清HMGB1参与急性脑梗死后的免疫炎症反应，不仅与早期神经功能缺损程度呈正相关，而且跟早期临床症状进展有密切联系，动态监测血清HMGB1的浓度变化可作为判断病情的严重程度及预后的有用参考指标。

3.4 TNF-α与EPCI的关系

肿瘤坏死因子超家族是一大类由多种免疫细胞分泌的具有复杂生物学效应的经典炎症细胞因子。TNF-α是其中的重要一员。本次研究中发现，两组患者血清TNF-α浓度从第1天至第7天均明显超过门诊危险因素匹配组（P<0.01），与Zaremba等[11]先前报道基本一致。验证了血清TNF-a参与脑梗死急性期的免疫炎症反应。但进展组与非进展组间动态水平变化却不一样，EPCI组患者血清TNF-α浓度从第1天至第7天逐渐升高；而NPCI组中，患者血清TNF-a浓度在第3天达到峰值，在第7天顯著回落，与文献[12]报道一致。Person关联性分析显示，NPCI组中第1、3、7天血清TNF-a浓度均与患者NIHSS呈正相关，而EPCI组中第7天无明显相关性。因此研究认为HMGB1在预测和观察EPCI中比TNF-α要好。

3.5 不足與展望

急性缺血性卒中是临床上的多发病、常见病，病源极其广泛，采用NIHSS评分对后循环梗死和入院及伴有意识障碍的患者评分不敏感，所以排除了这一部分患者。该部分患者需要更为合理的临床指标来评价及观察病情的进展。另外，由于观察收集的条件有限，本文仅仅观察了住院1周患者的预后情况，接下来的工作中，将对患者进行更长时间见得临床随访，来观察HMGB1与TNF-α早期升高与远期预后之间的关系。

参考文献

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[2] Zhao M，Zhang L，Wang Z，et al.Dynamic analysis of blood pressure changes in progressive cerebral infarction[J].Int Health，2015，7（4）：293-297.

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[9] Liesz A，Dalpke A，Mracsko E，et al.DAMP signaling is a key pathway inducing immune modulation after brain injury[J].J Neurosci，2015，35（2）：583-598.

[10] Yang Q W，Wang J Z，Li J C，et al.High-mobility group protein box-1 and its relevance to cerebral ischemia[J].J Cereb Blood Flow Metab，2010，30（2）：243-254.

[11] Zaremba J，Losy J.Early TNF-alpha levels correlate with ischaemic stroke severity[J].Acta Neurol Scand，2001，104（5）：288-295.

[12] Pires P W，Girgla S S，Moreno G M，et al.Tumor necrosis factor-α inhibition attenuates middle cerebral artery remodeling but increases cerebral ischemic damage in hypertensive rats[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol，2014，307（5）：H658-H669.

（收稿日期：2018-06-22）

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