肺肿瘤临床病理分型与变异型P53关系的研究
时间：2022-10-31 来源：博通范文网 本文已影响 人 
【摘要】 目的检测P53基因在肺癌组织中的表达,探讨其与肺肿瘤临床病理分型的关系。方法应用聚合酶链反应-单链多肽性-银染法检测(PCR-SSCP)检测在我院2007年6月至2008年6月住院接受治疗的肺癌患者96例的肺癌组织中的P53基因表达。用同样的方法检测20例良性肺部疾病的患者以作对照。结果在98例肺癌患者中P53的检出率为47.9%(46/96),与良性疾病患者的检出率5%(1/20)差异有显著性,P<0.01,且P53基因的表达与临床分期有关。结论P53基因突变在肺癌中发生率较高,可成为肺癌的血清标志物,检测P53基因突变有利于判定肺癌的临床分期。
【关键词】 肺癌P53基因临床分型突变
【中图分类号】 R734【文献标识码】 A【文章编号】 1674-0742(2011)01(b)-0129-01
肺癌是我国高发的恶性肿瘤之一,其转移率和死亡率较高,严重危害了患者的健康。P53基因是最重要的抗癌基因,是突变率最高的抑癌基因,其功能失活在肺癌的发生和发展过程中起着非常重要的作用[1]。相关文献报道,约50％～60％的非小细胞肺癌和80％小细胞肺癌有P53突变[2]。为探讨P53基因与肺肿瘤临床病理分型的关系,现对我院肺癌患者96例的肺癌组织中的P53基因表达进行检测,报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
该组患者96例,均为我院住院的肺癌患者,经病理学或细胞学证实为原发性支气管肺癌,留取标本前均未进行过肺癌化疗和放疗。其中男62例,女34例,年龄30～82岁,平均年龄62岁。其中腺癌30例,鳞癌42例,未分化癌24例,根据1985年国际抗癌联盟(UICC)第四届肺癌会议对肺癌TNM分期修正标准进行TNM期。其中Ⅰ～Ⅱ期38例,Ⅲ～Ⅳ期28例。有淋巴结累及转移(包括同侧肺门、支气管周围、对侧肺门和纵隔淋巴结等)64例,未转移32例。另良性肺部疾病20例,包括慢性阻塞性肺疾病、肺结核、肺脓肿和肺间质纤维化等,男11例,女9例,年龄20～75岁,平均年龄55岁。
1.2方法
肺癌96例患者经纤维支气管镜做支气管镜肺活检取肿瘤组织,距肿瘤约1.5cm处支气管肺组织(癌旁组织)和良性肺疾病20例,取病变较重的一侧支气管肺活检。标本均做P53基因检测、病理检查。PCR-SSCP检测P53基因第5～8外显子,E5、E6、E7、E8,引物由上海夏华生物公司合成,操作步骤按说明书进行,预变性95℃ 2min后,按95℃40s,63℃45s,72℃30s延伸72℃5min,参数循环35个周期,PCR扩增产物4℃保存。反应完成后,取5μL反应液用1.5%的琼脂糖电泳观察PCR产物的扩增情况,如在预期位置有清晰的扩增带,则可进行下一步的SSCP电泳。若扩增带很弱或无带,则采用巢式PCR,每次均设置阴性对照。
1.3结果判定统计学处理
每次电泳都以正常肺组织扩增产物作对照,出现条带的增多、减少或位置的变动,即判定该样品存在P53基因突变,为阳性。用SPSS 11.0统计软件。记数资料采用均数±标准差表示,组间计量资料采用t 检验,计数资料比较用c2检验,P <0.05差异有统计学意义。
2结果
(1)肺癌组织和良性P53基因突变检出率比较。肺癌组织P53基因的检出率为47.9%(46/96),高于癌旁组织16.7%(16/96),也高于良性肺疾病支气管肺组织的5%(1/20),差异有极显著性,c2=23.65,36.58,P <0.01。E5突变为24例次,E5突变为13例次,E7突变为8例次,E8突变为14例次,其中有3例,检测出有外显子突变。(2)2组患者P53基因肿瘤细胞阳性率、联合检出率。肺癌患者癌组织活检标本中肺癌组织P53基因的检出率为47.9%(46/96),肿瘤细胞的阳性率为81.3%(78/96),联合检出率为87.5%(84/96);良性肺疾病三者的检出率为5%(1/20),0%(0/20),5%(1/20),差异有极显著性,c2=31.97,14.57,27.54,P <0.01。(3)肺癌临床分期与P53基因突变的关系。肺癌Ⅰ～Ⅱ患者与Ⅲ～Ⅳ患者的P53基因点突变,差异极显著性,P <0.01,见表1。
3讨论
肺癌是世界上最长见的恶性肿瘤之一,虽然当今科学医疗技术有了突飞猛进的发展,但是肺癌的早期诊断、复发和转移的早期发现仍然是当前临床工作面临的难题。P53基因是最重要的抗癌基因,肺癌的P53基因突变率居人类各肿瘤之首。国内外关于P53基因与肺癌临床分期的关系已有很多报道,但结果不一致,大多数的研究结果认为如果检测出P53蛋白蓄积预示着肺癌患者肿瘤侵袭力强,预后差[3]。本文结果表明P53基因在肺癌组织中的表达高于正常组织,P <0.01,且该基因的表达与肺癌的临床分期有密切的关系,肺癌Ⅲ～Ⅳ患者比Ⅰ～Ⅱ患者P53基因点突变要高,差异极显著性,P <0.01。因此,P53基因突变在肺癌中发生率较高,可成为肺癌的血清标志物,且P53抗体多数属于IgG,少数属于IgM,其理化性质非常稳定,能够在-80℃长期保存,对抗体活性无影响。良好的稳定性,其取材方便,有利于术后动态监测,具有一定的临床价值,有广泛的临床应用前景[3]。检测P53基因突变有利于判定肺癌的临床分期。
参考文献
[1]苏春康,李晓莉.血清及胸水P53抗体检测对肺癌的临床诊断意义[J].保健医学研究与实践,2010,7(1):35～37.
[2]陈余清,蔡映云,刘黎.肺癌患者肺组织和痰标本P53基因突变检测及其临床意义[J].中华结核和呼吸杂志,2002,25(11):667～669.
[3]王剑,高大庆,傅翠梅.肺癌P53基因突变检测及临床意义[J].肺瘤研究与临床,2000,12(1):6～7.
【收稿日期】 2010-12-15
